2.2.4 线性关系考察

分别精密吸取混合对照品溶液1、不同5、树脂数鸡10、环纹15、血藤析和20、药材25、质量30μL注入高效液相色谱仪中，不同按上述色谱条件分析。树脂数鸡以峰面积（Y）为纵坐标，环纹对照品进样量（X）为横坐标，血藤析和绘制标准曲线，药材得到的质量回归方程及相关系数分别为：Y=2×109X-23 374,r=0.999 9;Y=6×108X-18 200,r=0.999 5;Y=4×108X-13 246,r=0.999 3；表明原儿茶酸在0.021 95～0.658 5μg，儿茶素在0.047 2～1.416μg，不同表儿茶素在0.041 5～1.245μg时，树脂数鸡峰面积与进样量呈良好的环纹线性关系。

2.2.5精密度试验

精密吸取混合对照品溶液，按“2.2.1”项下色谱条件重复进样6次，结果原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素峰面积的RSD分别为0.35%、0.45%、1.83%，表明仪器精密度良好。

2.2.6 稳定性试验

取样品粉末1.0 g，精密称定，按“2.2.3”项下方法制备供试品溶液，室温放置，分别于0、2、4、6、8、13、24 h进样测定，结果原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素峰面积的RSD分别为1.52%、1.76%、1.15%，说明样品在24 h内稳定。

2.2.7 重复性试验

取同一样品粉末6份，每份1.0 g，精密称定，按“2.2.3”项下方法制备供试品溶液，进样测定，结果显示原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素峰面积的RSD分别为0.91%、0.61%、0.65%，表明重复性良好。

2.2.8 加样回收率试验

取已知含量的样品粉末6份，每份1.0 g，精密称定，分别精密加入原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素对照品，按“2.2.3”项下方法制备供试品溶液并测定，计算加样回收率。结果见表2。

2.2.9 样品含量测定

取鸡血藤粉末1.0 g，精密称定，每批药材平行3份，按“2.2.3”项下方法制备供试品溶液并进样测定，并计算含量。结果见表3和图2。

2.3 芒柄花素、染料木素含量

测定参照梁永枢等[10]方法进行测定。

2.3.1 色谱条件

Waters Xselect C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）；流动相：0.1%H3PO4-乙腈（66∶34），等度洗脱；检测波长：254 nm；流速：1 m L·min-1；柱温：25℃；进样量：20μL。对照品及供试品溶液色谱图见图3。

2.3.2 对照品溶液的制备

分别精密称定染料木素和芒柄花素对照品1.90、1.19 mg，加甲醇定容至5 m L，制成对照品贮备液。分别精密吸取染料木素、芒柄花素对照品贮备液1 m L，定容至5 m L作为混合对照品溶液。

2.3.3 供试品溶液的制备

取样品粉末约1 g，精密称定，加70%乙醇30 m L加热回流提取2次，每次15 min，合并2次提取液，减压回收溶剂至干，残渣加甲醇定容于5 m L棕色量瓶中，摇匀，作为供试品溶液。

2.3.4 标准曲线的制备

分别吸取“2.3.2”项下各对照品溶液20μL注入液相色谱仪中，测定峰面积积分值。以峰面积（Y）为纵坐标，对照品的进样量（X）为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程与相关系数分别为：Y=8×109X-192 794,r=0.999 9;Y=6×109X-99 356,r=1；表明染料木素在0.076～2.28μg，芒柄花素在0.047 6～1.42μg时，峰面积与进样量呈良好的线性关系。

2.3.5 精密度实验

精密吸取对照品溶液20μL，按“2.3.1”项下色谱条件重复进样6次，结果染料木素、芒柄花素的RSD分别为1.15%、0.95%，表明仪器精密度良好。

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